Free Download Bakterientransformation Minipräparation Restriktionsanalyse und PCR. Protokolle zum Genetik-Praktikum für Lehramt der Sekundarstufe II (German Edition)


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Fachbuch aus dem Jahr 2002 im Fachbereich Biologie - Genetik / Gentechnologie, Note: sehr gut, Heinrich-Heine-Universitt Dsseldorf (Biologie-Institut), Sprache: Deutsch, Abstract: Das Erbgut hherer Organismen liegt im Zellkern in Form von Chromosomen vor. Um das Erbgut, die DNA, zu untersuchen und zu charakterisieren muss es isoliert und vom Rest der Zelle getrennt werden. Exemplarisch soll aus einem pflanzlichen (Tomate) und einem tierischen ( Kalbsbries) Organismus die DNA isoliert und sichtbar gemacht werden. Das methodische Prinzip, das diesem Isolierungsverfahren zugrunde liegt, ist auf alle Organismen anwendbar. Das entsprechende Gewebe wird im kalten Zustand gemrsert oder zerkleinert, bis es pulverisiert ist. Zum Aufschluss der Zelle wird das Gewebe einem bestimmtem Puffer zugesetzt. Dieser Puffer sollte zellwandzerstrende Detergenzien wie SDS, welches an Proteine bindet und diese denaturiert und zellwandverdauenden Enzyme wie z.B. die Proteinase K. enthalten. Im Praktikum hat unsere Gruppe Zahnpasta der Marke Ajona benutzt, um den Gewebeaufschluss herbeizufhren. Nach einer Inkubationszeit erfolgen Reinigungsschritte mit organischen Lsungsmitteln, um Zellwandreste, sowie zellulre Proteine zu entfernen. Um dies zu realisieren benutzt man Salze, deren positiv geladenen Ionen die negativ geladenen Phosphatgruppen des DNA-Rckgrats sttigen und Alkohol wie z.B. Ethanol. Ethanol fllt die DNA (Przipitation). Ethanol macht die sehr langen, fadenfrmigen DNA-Molekle wasserunlslich, indem es ihnen die umgebenden Wassermolekle entzieht. Die DNA-Fden lagern sich aneinander oder verknulen sich und fallen als eine groe, sichtbare Flocke aus. Die DNA befindet sich nun in einem festen Zustand und kann vom Rest der Lsung ( Zellbruchstcke, Proteine) getrennt werden. Die gefllte DNA kann darauf in Wasser resuspendiert werden und liegt nun konzentriert vor. Um Informationen ber die DNA zu erlangen, wird diese einer Gelelektrophorese unterzogen. Aus den D
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